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使用胎牛血清過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題解答

更新時(shí)間:2020-07-29  |  點(diǎn)擊率:797

培養(yǎng)珍貴的干細(xì)胞和較難養(yǎng)的細(xì)胞大部分實(shí)驗(yàn)室均采用胎牛血清作為實(shí)驗(yàn)耗材,它為細(xì)胞生長(zhǎng)提供了必要的營(yíng)養(yǎng)成分。但使用胎牛血清的過(guò)程也會(huì)常常出現(xiàn)問(wèn)題,我們來(lái)細(xì)數(shù)下。

細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?

一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。

如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒(méi)有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):

(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老,破碎的細(xì)胞殘骸;

(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);

(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。

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